Folotto人参皂苷

新闻中心

【学术分享】《人参皂苷Rg3抑制肿瘤新生血管形成的研究》

发布时间:21-06-26

注:人参皂苷(dèi)是人参皂苷(gèn)。

研究文献来源:《第二军医大学学报》

作者:高勇、王杰军、许青、叶琴琴、郭静、耿怀成(第二军医大学长征医院肿瘤科、上海200003)

莱菲得 纯参原 生命原 LIFEADE 人参皂苷Rh2 人参皂苷Rg3 稀有人参皂苷含100%

目的:探讨人参皂苷Rg3抗肿瘤生长的作用机制。

方法:利用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)观察Rg3作用后肿瘤新血管的生长状况,采用Lewis肺癌模型,进一步探讨Rg3对体内肿瘤生长和肿瘤新血管形成的影响。

结论:人参皂苷Rg3能明显抑制Lewis肺癌的生长,其抑制肿瘤的作用部分是抑制肿瘤诱导的新血管形成。

文献节的选择:

新生血管形成是实体肿瘤快速增长所必需的前提条件之一。另一方面,新生血管可以给肿瘤细胞带来丰富的氧气和养分,带走废物,另一方面,肿瘤细胞可以通过新生血管向远方转移。因此,探讨肿瘤新生血管形成机制成为当前肿瘤研究领域的另一个重要课题。研究表明,血管内皮细胞生长因子(VEGF)和碱性纤维细胞生长因子(BFGF)是刺激血管内皮细胞增殖、转移、血管形成的两个最主要因子,通过药物抑制肿瘤新生血管的形成,可以有效地控制恶性肿瘤的生长和长期转移。

Rg3是人参皂苷中的重要成分,在体内具有明显的肿瘤抑制作用。本研究通过体外鸡胚绒尿囊膜(CAM)实验和荷瘤鼠体内实验,进一步探讨Rg3的抗肿瘤作用机制。

1材料和方法。

l.l材料。

Rg3系从中国生产的东北红参中提取,纯度>99.5%,粉剂溶于二甲基明矾(DMSO),常温保存。使用前用RPMI1640制作l0mmol/L(用于CMA实验)或10mg/ml(用于动物实验),DMSO的终浓度为<0.1%。鸡胚由上海市大江养鸡场提供。Lcwis肺癌小鼠由上海市医药工业研究所提供。苏拉明从Sigma公司购买。实验动物为C57BL/6鼠,由中科动管提供,雌性,体质19-2lg。

l.2方法。

l.2.lCAM实验。

参照Pctcr等介绍的方法稍作改进。取第七天的胚胎,通过光线找到胚胎,用手轻轻剥去直径为lcm大小的蛋壳的同时,在胚胎室开小孔,用负压吸引,剥去蛋壳的地方形成人工气室,小心去除壳膜,暴露CAM。将浸泡一定浓度药物的滤纸轻轻放在CAM上。实验组的情况如下:空白对照组只包括(0.1%DMSO),药物组分为0.l和0.5mmol/LRg3两亚组。每组6个鸡胚。最后,用伤口膜封住缺口,放入恒温箱培养,培养条件为37℃,湿度为70%。以上操作均在超净台内进行。3d后取出鸡胚,局部用丙酮和无水乙醇固定l0min,切下放有滤纸的CAM,去除滤纸。解剖显微镜下随机选择5个视野计数过滤纸区域内可见血管分支点数,计算血管生长指数。

l.2.2动物实验。

取生长良好的Lcwis肺癌老鼠肿瘤组织,用生理盐水以l:5的比例均匀浆制成细胞悬液,在老鼠腋下接种0.2ml后随机组。设置生理盐水对照组和环磷酰胺(CTX)阳性对照组(100mg/kg,分别在接种后的第1、5、9、13、17天腹腔内给药)Rg3设置5、10、20mg/kg给药组,给药体积为0.5ml/只,从接种后的第二天开始第二天给胃,共给药10次。接种后第20天,脱颈处死动物,解剖取出肿瘤,称为质量,计算肿瘤生长抑制率。

l.2.3肿瘤引导的新生血管计数。

参考Krcislc和Lrshlcr的方法,部分改进:荷兰肿瘤鼠Rg3口服1周后,静静注入l%伊文蓝溶液后,立即处死鼠,取出肿瘤体,在解剖显微镜下计算向肿瘤体方向生长的血管。

l.3统计学处理。

采用SPss7.0统计软件,进行差距分析。

2结果。

2.1Rg3抑制CAM血管的形成与对照组相比,Rg3浓度为0.1和0.5mmol/L时,可AM血管的形成明显受到抑制(图l)。与未处理的CAM血管生长情况相比,对照组、Rg30.lmmol/L组和0.5mmol/L组血管生长指数分别为(91.l±8.2)%、(62.4士9.3)%、(45.6士5.7)%。Rg3组和空白对比组的区别非常显着(p<0.01)。

莱菲得 纯参原 生命原 LIFEADE 人参皂苷Rh2 人参皂苷Rg3 稀有人参皂苷含100%

2.2Rg3对Lcwis肺癌肿瘤体生长的抑制作用。

5组老鼠接种后,经过不同的处理,20d后各组老鼠肿瘤的生长状况见表l。结果与空白对照组相比,CTX组和Rg3组肿瘤的成长明显受到抑制。

莱菲得 纯参原 生命原 LIFEADE 人参皂苷Rh2 人参皂苷Rg3 稀有人参皂苷含100%

2.3Rg3对Lcwis肺癌引导的新生血管抑制作用。

Rg3对肿瘤诱导的新血管形成有明显的抑制作用,与苏拉明集团比较,差异不明显(表2)。

莱菲得 纯参原 生命原 LIFEADE 人参皂苷Rh2 人参皂苷Rg3 稀有人参皂苷含100%

3讨论。

人参皂苷Rg3是中药人参中存在的四环三泌皂苷,其分子式为C42H72O13。研究表明,人参皂苷Rg3体外对鼠腹水肝癌细胞(MM1)、黑素瘤B16FE7细胞、人小细胞肺癌细胞(OC210)和人胰腺癌细胞(PSN21)的浸润具有很强的抑制作用,结构相似的同系物参皂苷Rb2和20(R)2Rg2的浸润作用较弱,人参皂苷Rh1、Rh2、20(R)2Rh1、Rb1、Rc和Re没有浸润活性。人参皂苷Rg3对高转移性老鼠黑素瘤细胞(B16FE17)肺转移BALB/C老鼠结肠癌细胞(262M3.1)肺转移具有抑制作用,其抗肿瘤转移的作用与抑制肿瘤细胞浸润、粘附和抗新生血管形成的活性有关。

动物实验进一步证明Rg3可以显着抑制鼠大肠癌腹膜转移。人参皂苷Rg3可明显提高普通老鼠和荷兰老鼠的免疫功能,与放置、化疗合用具有明显的减毒效果,可延长荷兰老板的生存期,毒理学研究没有显示出明显的毒性。本研究结果显示,Rg3对Lewis肺癌的生长有明显的抑制作用,抗肿瘤率随药剂量的增加而增强。

转移是恶性肿瘤恶性程度的主要标志,血管形成被认为是肿瘤转移的主要步骤,因此抗肿瘤新生血管形成已成为目前肿瘤防治研究的热点。肿瘤新生血管形成是血管内皮细胞在肿瘤细胞和浸润淋巴细胞分泌的许多细胞生长因子的调节下增殖、转移和小管形成的过程。这些成长因子中最重要的是VEGF和bFGF。研究发现,人参皂苷Rg3在抑制Lewis肺癌肿瘤体生长的同时,对肿瘤诱导的新血管形成也有明显的抑制作用。苏拉明是最早研究的抗肿瘤新生血管形成的药物之一,其抗新生血管活性通过抑制bFGF产生而发挥作用。

本研究结果显示,Rg3也具有与苏拉明相似的抗新血管作用。另外,通过CAM实验观察Rg3对CAM血管的形成有明显的抑制作用,直接证明Rg3具有抗新血管形成的作用。研究结果表明,Rg3可以明显抑制Lewis肺癌的生长,其抑制肿瘤的作用部分可能是抑制肿瘤诱导的新血管形成的作用。

26

06
2021年